在RQ-PCR中,管家基因的引物应如何设置?

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/11/08 00:32:31

在RQ-PCR中,管家基因的引物应如何设置?
在RQ-PCR中,管家基因的引物应如何设置?

在RQ-PCR中,管家基因的引物应如何设置?
housekeeping gene的引物设计与你想探测的目标基因引物设计方法相同,而且一般文献上都应该给出,遵照文献使用即可,一般问题都会出在目标基因的引物设计上.不过在q-PCR中,housekeeping gene 引物还需注意以下几点
1.首先找到合适的housekeeping gene,其表达应具有一致可参考性.
2.引物长度在17-22bp.
3.引物退火温度在57°-60°之间,并且各个引物之间的退火温度差异不能超过1°.
4.引物所扩增基因的大小在50-400bp间,通常不超过200bp为宜.
5.引物本身无自身折叠,或者两引物之间互补的情况存在.
6.引物设计所扩增的目标基因,最好是跨越两段外显子的区域,这保证引物所扩增的基因,全部来自mRNA转化的cDNA,而非基因组DNA.

在RQ-PCR中,管家基因的引物应如何设置? 设计简单的引物；如何通过PCR获得目的基因做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因啊? 做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因 PCR中引物如何设计, RT-PCR的引物如何设计?本人刚接触RT-PCR,需要从其它几个物种基因的保守序列中,设计出另一个物种这个基因RT-PCR引物,但是实在是一头雾水, PCR的扩增基因的引物是什么荧光定量PCR引物设计本人在做荧光定量PCR之前,先用Primer 3.0设计了目的基因的引物,用于半定量PCR,而且也把引物放入NCBI中进行了blast比对,得到引物为特异性引物,半定量PCR效果也跟预期一样,电 pcr中引物的作用在PCR技术中,靶基因复制需要的引物是什么?本人知道寡核苷酸作引物,但到底它属于DNA还是RNA? 高中生物中pcR中引物如何设计为什么在基因克隆中,除开设计PCR引物还要设计表达基因引物?如题.设计表达引物有什么要求吗? 请问在PCR实验中,如果不知道模板DNA的核酸序列的情况下如何设计PCR引物?最近一直在学PCR. 设计引物如何保证基因完整PCR的产物只是基因的一部分啊,如何设计一对引物保证基因完整. 谁能通俗易懂的给我解释一下PCR反应过程中,引物与模板如何结合?扩增出来的是上下游引物之间的片段呢?还是就是引物片段?最终目的不是扩增目的基因,观察多态性的. pcr扩增中,如何设计引物? 在高中阶段,PCR技术中引物的作用是什么如何设计rt-pcr 引物?怎样鉴别基因内的intron and extron?