pcr 条件我做了IGF-1基因5'调制区的,按照别人发的文章条件跑的PCR,自己又优化了条件,结果PCR产物经检测,有目的条带,但好像在100bp下面有一条条带,我怀疑是引物二聚体.请问各位有什么办法能

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/08 00:29:44

pcr 条件我做了IGF-1基因5'调制区的,按照别人发的文章条件跑的PCR,自己又优化了条件,结果PCR产物经检测,有目的条带,但好像在100bp下面有一条条带,我怀疑是引物二聚体.请问各位有什么办法能
pcr 条件
我做了IGF-1基因5'调制区的,按照别人发的文章条件跑的PCR,自己又优化了条件,结果PCR产物经检测,有目的条带,但好像在100bp下面有一条条带,我怀疑是引物二聚体.请问各位有什么办法能将这条带去掉呀?退火温度我做了梯度试验,55-61度.
目的条带很清楚,最下面有引物二聚体条带,这样的PCR的产物能做酶切吗?

pcr 条件我做了IGF-1基因5'调制区的,按照别人发的文章条件跑的PCR,自己又优化了条件,结果PCR产物经检测,有目的条带,但好像在100bp下面有一条条带,我怀疑是引物二聚体.请问各位有什么办法能
引物二聚体出现没关系的,直接回收目的条带即可.对实验没有什么影响.

太专业了!!!!!!!!!!!!!!!!

引物二聚体不会影响酶切,因为你做酶切之前,PCR产物要经过电泳,切胶,纯化,这些步骤早就已经去除了包括引物二聚体在内的杂质。
如果你想要电泳图漂亮,非得没有引物二聚体,那也可以,减少引物在PCR反应体系中的量,减半差不多了。如果你做61度的时候还能做出目的条带,那可以考虑63度退火,这样也可以减少引物二聚体...

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引物二聚体不会影响酶切,因为你做酶切之前,PCR产物要经过电泳,切胶,纯化,这些步骤早就已经去除了包括引物二聚体在内的杂质。
如果你想要电泳图漂亮,非得没有引物二聚体,那也可以,减少引物在PCR反应体系中的量,减半差不多了。如果你做61度的时候还能做出目的条带,那可以考虑63度退火,这样也可以减少引物二聚体

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pcr 条件我做了IGF-1基因5'调制区的,按照别人发的文章条件跑的PCR,自己又优化了条件,结果PCR产物经检测,有目的条带,但好像在100bp下面有一条条带,我怀疑是引物二聚体.请问各位有什么办法能 简并引物的pcr扩增我照文献报道的虾的一个基因的保守区的简并引物及其pcr的条件,试着扩增蟹的这种基因,死活扩不出条带.于是我用虾的cdna做模板试下也没扩出带来?这是什么原因啊?优化了 IGF-1Ea是什么 做PCR如何设置条件 您好,我儿子基因检测报告出来了,不太明白.a地中海贫血1基因(SEA) PCR法 结果 基因缺失,a-地贫1基因杂您好,我儿子基因检测报告出来了,不太明白.a地中海贫血1基因(SEA) PCR法 结果 基因缺失,a-地 RT-PCR扩增条件问题我是做real-timePCR,需要测定六个基因的mRNA表达差异.这六个基因我是分开来扩增的,因为样本太多.每个样本都达到了平台期的,并且我所加的mRNA的模板数、引物量、dye、mix都是 在PCR扩增基因时为什么要用限制性内切酶我和一同学都在做基因多态性的实验,我俩选的基因不同,查阅了文献,我做PCR扩增时,不需要限制性内切酶,并且我已做出和文献上一样的基因条带;而 rp49基因是什么基因,很多做半定量PCR的用这个基因做内参,想了解下该基因是否是rRNA RT-PCR产物电泳结果只有引物二聚体,没有目的条带,更换引物了也这样,最近2个月反复做PCR跑电泳一直都是只有引物二聚体没有目的条带,我的PCR条件是这样的模板1ul (浓度100ng)引物上下游各1u RT-PCR产物电泳结果只有引物二聚体,没有目的条带,更换引物了也这样,最近2个月反复做PCR跑电泳一直都是只有引物二聚体没有目的条带,我的PCR条件是这样的模板1ul (浓度100ng)引物上下游各1u 最近在做实验RT-PCR,我做RT-PCR,一对引物Tm值分别是52.2,54.6.目的片段1062,PCR反应条件怎么设置呀 我做转基因植物,最近一直做PCR鉴定,但只有引物二聚体,原因会有哪些?转同样的基因,在转基因烟草的PCR鉴定时,能P出目的条带,而且我用的是相同的条件来做我的却得不到结果.会不会和物种有 pcr 不出来我现在在做pcr,这个位点开始做的时候还出结果,可做二天后就不出结果了,条件和以前的一样,很不稳定,有时候出,有时候不出结果, 跑PCR摸条件该怎么做跑PCR摸退火温度该怎么做,与Tm值有什么关系吗我看了那个网站,可是不能下载附件 对于一段有重复序列的片段如何扩增,只是一个基因的中间的部分序列,准备扩增做overlap.我在两端设计的无配对引物,无法扩增目的条带,不知对PCR 条件有什么要求? PCR产物酶切的问题我做的是PCR-RFLP法分析SNP:引物是参照文献设计,takara合成的.订购的是takara的Taq酶.PCR 条件也是文献中的,1%琼脂糖电泳显示PCR产物大小为290bp.用文献报道的Msp I文字1μL,PCR产物 做ISSR 的PCR条件优化我想根据这几个做个正交试验 模板浓度,dNTP,引物浓度,taq酶,Mg离子浓度是不是太多了……?退火温度我用梯度PCR基本弄好了,总体积25μl,模板1μl,引物1μl,其它用的是mix跑的, Real time pcr目的基因Ct值相差1,内参差不多是怎么回事?做了2次都这样,不想是加样的问题