16sRNA的一些问题16sRNA的通用引物好像有很多不同的序列段,不知道该如何选择,而且我还想知道,为什么16sRNA测序之前必须要用载体转化,为什么不能PCR跑胶之后回收,然后直接测序呢?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/08 04:39:53

16sRNA的一些问题16sRNA的通用引物好像有很多不同的序列段,不知道该如何选择,而且我还想知道,为什么16sRNA测序之前必须要用载体转化,为什么不能PCR跑胶之后回收,然后直接测序呢?
16sRNA的一些问题
16sRNA的通用引物好像有很多不同的序列段,不知道该如何选择,而且我还想知道,为什么16sRNA测序之前必须要用载体转化,为什么不能PCR跑胶之后回收,然后直接测序呢?

16sRNA的一些问题16sRNA的通用引物好像有很多不同的序列段,不知道该如何选择,而且我还想知道,为什么16sRNA测序之前必须要用载体转化,为什么不能PCR跑胶之后回收,然后直接测序呢?
PCR产物直接测序是用PCR引物进行测序,
而测序两端引物结合位点会有几十个碱基读不出来.
这个是目前技术问题,所有公司的测序仪器都读不出来.
而TA克隆之后就是用载体的通用引物测序,
因为载体的序列是知道的,
所以即使两端有一部分读不清
也没有关系,
这样两个反应就可以测通拼接得到全长序列了.