请问有人知道基因克隆载体中PGEX的特点吗?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/09 04:48:16

请问有人知道基因克隆载体中PGEX的特点吗?
请问有人知道基因克隆载体中PGEX的特点吗?

请问有人知道基因克隆载体中PGEX的特点吗?
是PGEX系列表达载体吧?
pgex特点就是带有GST标签,可以增加目的蛋白的溶解度.另外pgex载体是不能变性复性的,因为GST标签的活性会发生改变.

pgex特点就是带有GST标签,可以增加目的蛋白的溶解度,别的没什么特点,属于大众型载体,目前也较常使用。你说的没有表达有没有做全菌的sds-page啊,不管是不是形成包涵体全菌电泳都应该有条带,至于形不形成包涵体就取决于你的iptg浓度和诱导温度了,iptg越低,温度越低可溶性越好,我们曾做过0.1的iptg,4度诱导过夜的。因为pgex载体是不能变性复性的,因为GST标签的活性会发生改变。如果...

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pgex特点就是带有GST标签,可以增加目的蛋白的溶解度,别的没什么特点,属于大众型载体,目前也较常使用。你说的没有表达有没有做全菌的sds-page啊,不管是不是形成包涵体全菌电泳都应该有条带,至于形不形成包涵体就取决于你的iptg浓度和诱导温度了,iptg越低,温度越低可溶性越好,我们曾做过0.1的iptg,4度诱导过夜的。因为pgex载体是不能变性复性的,因为GST标签的活性会发生改变。如果是全菌都没有表达,首先检查是不是你插入序列的问题,排出后看看是不是稀有密码子的问题,真核基因在原核细胞中表达会受到大肠杆菌稀有密码子的影响,网上有分析软件。如果稀有密码子比较多可以使用rosetta菌株来表达,应该能出来的,只要不是你序列的问题,没有出不来的蛋白,只是溶不溶,有没有活性的问题。

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请问有人知道基因克隆载体中PGEX的特点吗? PGEX系列表达载体的特点我在用其他载体做表达的时候出现了一点问题,有人建议我用pegx系列的载体试一试,请问一下PGEX 系列表达载体有什么特点,在原核中表达,我设了5个iptg浓度,以及4个时 有人找公司合成过目的基因吗?拿到克隆了目的基因的载体后,能否直接导入大肠杆菌中直接扩增? 基因克隆的载体有哪些基本特征 怎么查克隆基因载体的来源? 请问各位专家克隆3kb的基因,用什么样的载体 在基因克隆中如何防止载体分子的自身环化作用 在基因克隆过程中,如何避免载体自连提高重组子的筛选效率 基因克隆操作中为什么要用到载体? 采用质粒载体克隆目的基因,请问如何准确筛选出带有目的基因的阳性克隆?实验方案和基本流程? 如何以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码蛋白的基因,并使之在大肠杆菌中表达 目的基因未连接到克隆载体上这是为什么?我用的克隆载体是PMD-18! 基因克隆需要组培方面的内容吗基因克隆方向做组培是为什么呢?做的是早花基因克隆,同时培养未分化的花芽,请问有人知道是为什么吗?是为了测定生理指标吗?查阅一些文献都不知道具体目 引物的设计原则t18载体和t18simple载体的酶切位点t18载体和t18simple载体的酶切位点,是不是可以做大部分基因的克隆载体呢? 请问有几种t载体?分别克隆了什么基因,酶切位点是什么? 如何以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆人的P53基因?并作最终鉴定.人的P53基因可从人细胞的mRNA中获取. 载体构建酶切位点的问题18—T克隆载体与目的基因连接后,送去测序,Blast之后得到序列,上面含有下一步的酶切位点,请问,目的基因序列包括酶切位点序列吗,师姐说不包括.酶切位点是PCR时加入 如果将PCR扩增的X基因片段与克隆载体连接,并转化入宿主大肠杆菌中,写出技术路线(包括基因和载体的连接、转化和鉴定)和关键点.