gc含量高pcr应该怎么扩

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/08 09:33:16

gc含量高pcr应该怎么扩
gc含量高pcr应该怎么扩

gc含量高pcr应该怎么扩
1、TakaRA有一种酶叫做TakaRa LA Taq酶是专门对高GC含量的,当扩增具有复杂的二级结构 (GC rich等) 的模板或具有重复序列的模板时,使用GC Buffer进行PCR扩增将非常有效.里面有两种GC buffer,如以人基因组DNA为模板,可很好地扩增c-jun proto oncogene 1,255 bp (GC含量65%) 的DNA片段 (使用GC Buffer I,II).请先使用Buffer I,当使用Buffer I 不能扩增时,再试用Buffer II.
2、TransStart FastPfu Fly DNA Polymerase 特点:(1)新型热启动;(2)快速扩增;(3)高保真性;(4)强扩增能力;(5)高灵敏度;(6)高产量;适用范围:1.扩增高GC含量、具有二级结构等复杂模板.2.高保真扩增,基因克隆,基因定点突变等.3.长片段扩增.
3、当然,也可以尝试对模板进行预变性,如加入适当的NaOH处理模板;
4、在PCR的时候加入一些增强剂,如甘油、DMSO等,也有助于打开复杂二级结构!

gc buffer,不行就买酶吧

gc含量高pcr应该怎么扩 gc含量高pcr应该怎么扩 PCR克隆中GC含量高如何扩出? GC含量太高会怎么样引物GC含量太高会对pcr产生什么影响啊? PCR引物GC含量过低时候,如何调整PCR体系? 什么原因造成GC含量高 PCR扩增gc含量很高的序列我要克隆一个gc含量很高(75%)的基因,然后在真核细胞表达,因为想要整个orf,但是终止子附近的gc 含量很高(大于80%),但还要把终止子突变掉,所以引物还必须在终 请问对于GC含量较高的片段怎么才能测通 GC含量的高低对PCR有什么影响啊?对PCR的成功率有什么影响? 为什么说gc含量高的dna变性温度高 小麦种GC含量高,说明了什么? PCR中的GC-clamps是什么意思 pcr 一段2000多bp的基因 引物设计时 条件怎么设 包括引物长度 gc含量等 因为我用软件设计时总是设不出来 可以改哪些参数呢 PCR扩增退火温度确定引物F:SIZE:20 TM56.9 %GC:55引物R:size:29 TM67 %GC:55根据TM=4*(G+C)+2(A+T)-5它的退火温度是多少?本人小菜鸟一枚,请教高手,主要是不懂从订单上怎么确定G+C及A+T的含量?我知道有 遇到GC含量高而难以完全变性的样品该如何处理? PCR 引物设计,在扩增一个基因片段,1200bp左右,编码区1000个bp左右.由于上游引物GC含量高,我想分两段扩增.设计一个引物,下游设计一个引物,上下游引物间想穿插(包含一定共同片段),这样成吗. 追问引物设计第一次PCR的产物胶回收后用纯化吗,还是可以直接当做底物?目的基因3‘端GC含量太高,导致上下游引物Tm值差别太大,这样可以用吗?是不是内引物条件可以适当放宽?还有,我用的是p pcr条件设定:我要p一个2000+bp的片段 pcr条件怎样设我的两个引物都是33bp GC含量为43% p过两次 都是引物二聚体