AFLP选择性扩增 这是怎么回事啊!预扩增已经看到片段在1000bp以下有所富集,可是在预扩引物3‘端加上选择性碱基后,怎么显得扩增到1000bp以上去了!还有,大家的ECOR1和MSE1的接头序列可不可以发

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/09 04:35:58

AFLP选择性扩增 这是怎么回事啊!预扩增已经看到片段在1000bp以下有所富集,可是在预扩引物3‘端加上选择性碱基后,怎么显得扩增到1000bp以上去了!还有,大家的ECOR1和MSE1的接头序列可不可以发
AFLP选择性扩增
这是怎么回事啊!
预扩增已经看到片段在1000bp以下有所富集,可是在预扩引物3‘端加上选择性碱基后,怎么显得扩增到1000bp以上去了!
还有,大家的ECOR1和MSE1的接头序列可不可以发上来大家核对一下啊.
我的是5=》3
Ecor1接头上链 CTCGTAGACTGCGTACC
Ecor1接头下链 AATTGGTACGCAGTCTAC
Mse1接头上链 GACGATGAGTCCTGAG
Mse1接头下链 TACTCAGGACTCAT
还有就是大家在合成接头时,是不是也是65度水浴10min,在室温下放置2个小时?然后4°冰箱保存下?
MARKER是2000的

AFLP选择性扩增 这是怎么回事啊!预扩增已经看到片段在1000bp以下有所富集,可是在预扩引物3‘端加上选择性碱基后,怎么显得扩增到1000bp以上去了!还有,大家的ECOR1和MSE1的接头序列可不可以发
我觉得你在预扩引物3‘端加上选择性碱基后,pcr应该更难拉出片段,不可能比第一次拉的还要长.我觉得这是跑胶的原因,你每次用的dna loading的不同,电泳缓冲液的不同都会导致结果会变一变,我建议你把第一次预扩增的产物和第二次预扩增的产物同时跑下胶,看是不是还是偏大.
我没有做过AFLP,只是根据我的经验推理的,因此你的第二个问题回答不了,建议你去看看分子克隆的标准protocol.

AFLP选择性扩增 这是怎么回事啊!预扩增已经看到片段在1000bp以下有所富集,可是在预扩引物3‘端加上选择性碱基后,怎么显得扩增到1000bp以上去了!还有,大家的ECOR1和MSE1的接头序列可不可以发 AFLP中“通过接头序列和PCR引物3端选择性碱基的识别,对特异性片段进行预扩增和选择性扩增”是啥意思? AFLP预扩产物有点大,选择性扩增后从点样孔开始都是弥散条带,年前都摸过条件,都很好,但是过年之后做,一直都没有做出来,郁闷 AFLP选择性碱基为什么使用三个而不是用四个 做AFLP酶切连接产物稀释多少倍作为预扩增模板合适呢? AFLP ECOR I 选择性核苷酸组合为什么是8种?分别是什么呢 以蒸馏水为模板进行PCR扩增,电泳检测有亮带 这是怎么回事? pcr扩增后用电泳带扩不出来是怎么回事 AFLP在什么情况下是共显性标记AFLP显示的只是扩增片段的有无,是显性标记,并不能区分二倍体生物的纯合和杂合状态,但是 什么情况下是共显性呢? 【求助/交流】PCR扩增后没有条带是怎么回事? 【求助/交流】PCR扩增后没有条带是怎么回事? PCR 产生比目的片段小的片段,这是怎么回事,怎么样处理?PCR扩增时,电泳后发现的得到的片段远远小于目的片段.目的片段曾今扩增出来过?这是什么原因,怎么样处理 . 做DNA的AFLP实验为什么用PAGE变性胶啊? AFLP标记是什么意思 aflp什么意思 根呼吸也影响植物对离子吸收的选择性.这句话根呼吸也影响植物对离子吸收的选择性.这句话错在哪里啊? 我做AFLP预扩,总是没有东西,没有smear现象,什么都没有,不知哪出错了? AFLP研究目的和意义